ໃນການຄົ້ນຄວ້າທາງຊີວະວິທະຍາ, polypeptides ທີ່ມີລໍາດັບຍາວແມ່ນປົກກະຕິແລ້ວຖືກນໍາໃຊ້.ສໍາລັບ peptides ທີ່ມີຫຼາຍກວ່າ 60 ອາຊິດ amino ໃນລໍາດັບ, ການສະແດງອອກຂອງ gene ແລະ SDS-PAGE ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ພວກມັນ.ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ວິທີການນີ້ໃຊ້ເວລາດົນແລະຜົນການແຍກຜະລິດຕະພັນສຸດທ້າຍແມ່ນບໍ່ດີ.
ສິ່ງທ້າທາຍແລະການແກ້ໄຂສໍາລັບການສັງເຄາະ peptide ຍາວ
ໃນການສັງເຄາະ peptides ຍາວ, ພວກເຮົາສະເຫມີປະເຊີນກັບບັນຫາ, ນັ້ນແມ່ນ, ອຸປະສັກ steric ຂອງຕິກິຣິຍາ condensation ເພີ່ມຂຶ້ນກັບການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງລໍາດັບໃນການສັງເຄາະ, ແລະເວລາຕິກິຣິຍາຕ້ອງໄດ້ຮັບການປັບເພື່ອເຮັດໃຫ້ຕິກິຣິຍາສໍາເລັດ.ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເວລາປະຕິກິລິຢາດົນກວ່າ, ຜົນຂ້າງຄຽງຫຼາຍແມ່ນຜະລິດ, ແລະສ່ວນຫນຶ່ງຂອງ peptide ເປົ້າຫມາຍໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ.ສານຕົກຄ້າງດັ່ງກ່າວ – ໂສ້ peptide ຂາດແມ່ນສິ່ງເສດເຫຼືອທີ່ສໍາຄັນທີ່ຜະລິດໃນການສັງເຄາະ peptide ຍາວ.ດັ່ງນັ້ນ, ໃນການສັງເຄາະ peptide ຍາວ, ບັນຫາທີ່ສໍາຄັນທີ່ພວກເຮົາຕ້ອງເອົາຊະນະແມ່ນເພື່ອຄົ້ນຫາເງື່ອນໄຂການຕິກິຣິຍາທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງແລະວິທີການຕິກິຣິຍາ, ເພື່ອເຮັດໃຫ້ປະຕິກິລິຍາການຂົ້ນຂອງອາຊິດ amino ມີຄວາມສົມບູນແລະເຕັມທີ່.ນອກຈາກນັ້ນ, ຫຼຸດຜ່ອນເວລາຕິກິຣິຍາ, ເພາະວ່າເວລາຕິກິຣິຍາດົນຂຶ້ນ, ປະຕິກິລິຍາຂ້າງຄຽງທີ່ບໍ່ສາມາດຄວບຄຸມໄດ້ຫຼາຍ, ຜະລິດຕະພັນທີ່ສັບສົນຫຼາຍ.ດັ່ງນັ້ນ, ສາມຈຸດຕໍ່ໄປນີ້ແມ່ນສະຫຼຸບໄດ້:
ການສັງເຄາະໄມໂຄເວຟສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້: ສໍາລັບບາງອາຊິດ amino ທີ່ພົບໃນຂະບວນການສັງເຄາະທີ່ບໍ່ງ່າຍທີ່ຈະປະສົມປະສານ, ການສັງເຄາະໄມໂຄເວຟສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້.ວິທີການນີ້ມີຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຫນ້າສັງເກດ, ແລະຫຼຸດຜ່ອນເວລາຕິກິຣິຍາຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ແລະຫຼຸດຜ່ອນການສ້າງຕັ້ງຂອງສອງຜະລິດຕະພັນທີ່ສໍາຄັນ.
ວິທີການສັງເຄາະ Fragment ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້: ໃນເວລາທີ່ບາງ peptides ຍາກທີ່ຈະຖືກສັງເຄາະໂດຍວິທີການສັງເຄາະທົ່ວໄປແລະບໍ່ງ່າຍທີ່ຈະເຮັດໃຫ້ບໍລິສຸດ, ພວກເຮົາສາມາດຮັບຮອງເອົາການ condensation ທັງຫມົດຂອງອາຊິດ amino ຫຼາຍໃນສ່ວນສະເພາະໃດຫນຶ່ງຂອງ peptide ກັບຕ່ອງໂສ້ peptide ທັງຫມົດ.ວິທີການນີ້ຍັງສາມາດແກ້ໄຂບັນຫາຈໍານວນຫຼາຍໃນການສັງເຄາະ.
ການສັງເຄາະ Acylhydrazide ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້: ການສັງເຄາະ acylhydrazide ຂອງ peptides ແມ່ນວິທີການສັງເຄາະໄລຍະແຂງຂອງ N-terminal Cys peptide ແລະ C-terminal polypeptide hydrazide ປະຕິກິລິຍາທາງເຄມີທີ່ເລືອກລະຫວ່າງການສ້າງພັນທະບັດ amide ເພື່ອບັນລຸວິທີການຜູກມັດ peptide.ອີງຕາມຕໍາແຫນ່ງຂອງ Cys ໃນລະບົບຕ່ອງໂສ້ peptide, ວິທີການນີ້ແບ່ງລະບົບຕ່ອງໂສ້ peptide ທັງຫມົດອອກເປັນຫຼາຍລໍາດັບແລະສັງເຄາະພວກມັນຕາມລໍາດັບ.ສຸດທ້າຍ, peptide ເປົ້າຫມາຍແມ່ນໄດ້ຮັບໂດຍຜ່ານປະຕິກິລິຍາການຂົ້ນຂອງແຫຼວໄລຍະ.ວິທີການນີ້ບໍ່ພຽງແຕ່ຫຼຸດຜ່ອນເວລາການສັງເຄາະຂອງ peptide ຍາວຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ແຕ່ຍັງຊ່ວຍເພີ່ມຄວາມບໍລິສຸດຂອງຜະລິດຕະພັນສຸດທ້າຍຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
ການຊໍາລະລ້າງ peptide ຍາວ
ໂດຍສະເພາະຂອງ peptides ຍາວ inevitably ນໍາໄປສູ່ການສະລັບສັບຊ້ອນຂອງ peptides crude.ດັ່ງນັ້ນ, ມັນຍັງເປັນສິ່ງທ້າທາຍທີ່ຈະຊໍາລະ peptides ຍາວໂດຍ HPLC.ຊຸດ amyloid ຂອງຂະບວນການ purification polypeptide, ດູດປະສົບການຫຼາຍແລະສົບຜົນສໍາເລັດການນໍາໃຊ້ໃນການຊໍາລະລ້າງຂອງ peptide ຍາວ.ໂດຍການຮັບຮອງເອົາອຸປະກອນໃຫມ່, ການປະສົມຂອງລະບົບການຊໍາລະລ້າງຫຼາຍ, ການແຍກຊ້ໍາແລະວິທີການປະສົບການອື່ນໆ, ອັດຕາຜົນສໍາເລັດຂອງການຊໍາລະລ້າງ peptide ຍາວໄດ້ຖືກປັບປຸງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
ເວລາປະກາດ: 18-04-2023