ການຖ່າຍໂອນພະລັງງານ resonance fluorescence (FRET)
ການໂອນພະລັງງານ resonance fluorescence (FRET) ແມ່ນຂະບວນການໂອນພະລັງງານທີ່ບໍ່ມີລັງສີທີ່ຜູ້ໃຫ້ທຶນຕື່ນເຕັ້ນລັດຈະຖືກໂອນໄປຫາລັດທີ່ຕື່ນເຕັ້ນຂອງຜູ້ຍອມຮັບໂດຍຜ່ານການໂຕ້ຕອບຂອງຄູ່ຜົວເມຍໄຟຟ້າ intermolecular.ຂະບວນການນີ້ບໍ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ photons ແລະດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງບໍ່ແມ່ນລັງສີ.ການທົດສອບນີ້ມີຂໍ້ດີຂອງໄວ, ລະອຽດອ່ອນ ແລະງ່າຍດາຍ.
ສີຍ້ອມຜ້າທີ່ໃຊ້ໃນການວິເຄາະ FRET ສາມາດຄືກັນ.ແຕ່ໃນຄໍາຮ້ອງສະຫມັກສ່ວນໃຫຍ່, ສີຍ້ອມທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ຕົວຈິງ.ໂດຍຫຍໍ້, ການໂອນພະລັງງານສະທ້ອນແສງແມ່ນການໂອນຄູ່ຂອງ dipoles ຈາກຜູ້ໃຫ້ທຶນ (ຍ້ອມ 1) ໄປຫາຜູ້ຮັບ (ຍ້ອມ 2) ເມື່ອກຸ່ມຜູ້ໃຫ້ທຶນມີຄວາມຕື່ນເຕັ້ນ.ໂດຍທົ່ວໄປ, spectrum ການປ່ອຍອາຍພິດຂອງກຸ່ມ fluorophore ຜູ້ໃຫ້ທຶນ overlaps ກັບ spectrum ການດູດຊຶມຂອງກຸ່ມ Acceptor."ເມື່ອໄລຍະຫ່າງລະຫວ່າງສອງ fluorophores ແມ່ນເຫມາະສົມ (10 - 100 A), ການໂອນພະລັງງານ fluorophore ຈາກຜູ້ໃຫ້ທຶນໄປຫາຜູ້ຮັບສາມາດສັງເກດເຫັນໄດ້."ວິທີການໂອນພະລັງງານແມ່ນຂຶ້ນກັບໂຄງສ້າງທາງເຄມີຂອງ receptor:
1. ຖືກປ່ຽນເປັນ vibration ໂມເລກຸນ, ນັ້ນແມ່ນ, ແສງສະຫວ່າງ luminous ຂອງການໂອນພະລັງງານຫາຍໄປ.(ຕົວຮັບແມ່ນ quencher ແສງສະຫວ່າງ)
2. ການປ່ອຍອາຍພິດແມ່ນມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຫຼາຍກ່ວາຕົວຮັບຂອງມັນເອງ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດການປ່ຽນສີແດງໃນສະເປກ fluorescence ທີສອງ."(ຕົວຮັບແມ່ນ emitters luminous).
ກຸ່ມຜູ້ໃຫ້ທຶນ (EDANS) ແລະ gene ຜູ້ຮັບ (DABCYL) ແມ່ນເຊື່ອມໂຍງຢ່າງເປັນເອກະພາບກັບທາດໂປຼຕີນຈາກທໍາມະຊາດຂອງເຊື້ອເອດສໄອວີ, ແລະເມື່ອຊັ້ນຍ່ອຍບໍ່ຖືກຕັດເຊື່ອມຕໍ່, DACYL ສາມາດບີບອັດ EDANS ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນກາຍເປັນ fluorine ທີ່ບໍ່ສາມາດກວດພົບໄດ້.ເມື່ອການຕັດການເຊື່ອມຕໍ່ຂອງເຊື້ອ HIV-1 protease, EDANS ຈະບໍ່ຖືກດັບໂດຍ DABCYL, ແລະ EDANS luciferases ສາມາດກວດພົບໄດ້ໃນພາຍຫຼັງ.ຄວາມພ້ອມຂອງສານຍັບຍັ້ງ protease ສາມາດຕິດຕາມໄດ້ໂດຍການປ່ຽນແປງຂອງຄວາມເຂັ້ມ fluorescence ຂອງ EDANS.
FRET peptides ແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ສະດວກໃນການສຶກສາ peptidase nonspecificity.ເນື່ອງຈາກຂະບວນການຕິກິຣິຍາຂອງມັນສາມາດຖືກຕິດຕາມຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ມັນສະຫນອງວິທີການທີ່ສະດວກໃນການກວດສອບກິດຈະກໍາຂອງ enzyme.ເງົາທີ່ຜະລິດຫຼັງຈາກ hydrolysis ຂອງພັນທະບັດ peptide ໂດຍຜູ້ໃຫ້ທຶນ / ຜູ້ຍອມຮັບສະຫນອງການວັດແທກກິດຈະກໍາຂອງເອນໄຊທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ nanomolar.ເມື່ອ FRET peptide ຄົງຕົວ, ມັນສະແດງໃຫ້ເຫັນເຖິງການຫາຍໄປຢ່າງກະທັນຫັນຂອງແຟດພາຍໃນ, ແຕ່ເມື່ອພັນທະບັດ peptide ໃດໆທີ່ກົງກັນຂ້າມກັບຜູ້ໃຫ້ທຶນ / ຜູ້ຍອມຮັບແຕກ, ມັນຈະປ່ອຍແຟດ, ເຊິ່ງສາມາດກວດພົບຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງແລະກິດຈະກໍາຂອງເອນໄຊສາມາດເປັນປະລິມານໄດ້.
ເວລາປະກາດ: ສິງຫາ-14-2023